姬松茸的建堆發酵與雙孢蘑菇一樣。將稻草、秸稈等或棉籽皮浸透水后與畜禽糞等分層鋪撒均勻建堆,一般建堆上寬1.2米,下寬1.5米,高1.3米。堆料后的3~4天,堆溫通常可達70℃左右。堆溫的測定一般以圓柱形溫度計插入料堆深約33厘米處為標準。5~7天后,堆溫就會下降,此時應翻堆。翻堆的目的是改善料層的空氣條件,散發堆內的廢氣,調整料堆的水分,同時添加化肥和石膏粉,改善發酵條件,讓微生物繼續生長繁殖,更好地促使堆溫回升,加速糞草分解,達到均勻腐熟。
第一次翻堆時加入尿素、硫酸銨等化肥并充分攪拌勻,在微生物的作用下,通過發酵變成適合姬松茸的氮源。5天后進行第二次翻堆,再按4天、3天的間隔翻堆5次, 共發酵24天左右。為了使堆料發酵均勻,翻堆時應把中間培養料翻到外面,把外層培養料堆進中間。發酵后培養料以達到棕褐色,手拉纖維易斷為度。堆制發酵后培養料含水量約為60%~75%,手抓一把培養料用力擠,指縫有二三滴水即為含水量適宜。將pH值調至9。為了制作均勻、完全成熟、高質量的培養料,翻堆非常重要,這是姬松茸產量高低的先決條件。